cko小鼠模型的构建方法有哪些?有何特点?
条件性基因敲除(Conditional Knockout,CKO)小鼠,又叫组织特异性敲除小鼠,与完全性敲除小鼠相比,它可以避免基因胚胎致死的问题,还可以实现基因在特异组织或者特定时间的表达,是精准研究靶基因功能的重要工具。那么,cko小鼠模型的构建方法有哪些?有何特点?据悉,条件性基因敲除(CKO)小鼠是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP和基因编辑技术,实现在特定的组织或细胞中基因敲除,而在其它组织或细胞中该基因表达正常的小鼠模型。它可在组织器官层面、不同发育阶段、不同生理病理等条件下解读各基因功能,可以提供细节更为丰富、证据更为确凿精准的研究数据,对阐述基因对各种生命过程的精细调控尤为重要。
cko小鼠模型的建系原则与流程包括:
1、与Cre小鼠杂交:与组织特异性的Cre小鼠杂交,获得去除Neo抗性且单条染色体有缺失的阳性F1组织特异性flox杂合子小鼠(flox/-)。
2、挑选⼀对F1代小鼠(flox/-)进⾏自交,通过PCR鉴定筛选得到组织特异性敲除基因的F2代flox纯合子小鼠(-/-)。
此外,cko小鼠模型建系要注意以下这几点:
1、诱导型的Cre工具鼠,需要加药后才能实现特异组织删除。
2、有生殖细胞泄露风险的Cre工具鼠,繁殖时按照建议性别选择不同基因型小鼠。
3、F1代若有剩余的flox杂合小鼠(flox/+),或想要加快获得目标小鼠,第2步可以用flox/+直接配Cre工具鼠,可缩短⼀代周期。
关于cko小鼠模型的构建方法,小编就先为大家简单的介绍到这里。集萃药康有丰富的条件性敲除小鼠品系资源,直接登录小鼠商城就可购买。若用户对此模型的构建与应用还有疑问,可以通过集萃药康的官网来进一步咨询获悉。
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