cko小鼠模型的构建方法有哪些？有何特点？

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　　条件性基因敲除（Conditional Knockout，CKO）小鼠，又叫组织特异性敲除小鼠，与完全性敲除小鼠相比，它可以避免基因胚胎致死的问题，还可以实现基因在特异组织或者特定时间的表达，是精准研究靶基因功能的重要工具。那么，cko小鼠模型的构建方法有哪些？有何特点？


　　据悉，条件性基因敲除（CKO）小鼠是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP和基因编辑技术，实现在特定的组织或细胞中基因敲除，而在其它组织或细胞中该基因表达正常的小鼠模型。它可在组织器官层面、不同发育阶段、不同生理病理等条件下解读各基因功能，可以提供细节更为丰富、证据更为确凿精准的研究数据，对阐述基因对各种生命过程的精细调控尤为重要。


　　cko小鼠模型的建系原则与流程包括：


　　1、与Cre小鼠杂交：与组织特异性的Cre小鼠杂交，获得去除Neo抗性且单条染色体有缺失的阳性F1组织特异性flox杂合子小鼠（flox/-）。


　　2、挑选⼀对F1代小鼠（flox/-）进⾏自交，通过PCR鉴定筛选得到组织特异性敲除基因的F2代flox纯合子小鼠（-/-）。


　　此外，cko小鼠模型建系要注意以下这几点：


　　1、诱导型的Cre工具鼠，需要加药后才能实现特异组织删除。


　　2、有生殖细胞泄露风险的Cre工具鼠，繁殖时按照建议性别选择不同基因型小鼠。


　　3、F1代若有剩余的flox杂合小鼠（flox/+），或想要加快获得目标小鼠，第2步可以用flox/+直接配Cre工具鼠，可缩短⼀代周期。


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