过表达细胞系构建吸附法试剂盒在血清检测中的应用原理

浪子回头二瞅

　　酶联免疫吸附实验（ELISA）是一种常用的血清学检测方式。今天由小蔚为大家详解酶联免疫吸附实验的工作原理及应用。了解酶联免疫吸附实验（ELISA）如何检测血清。
　　ELISA血清学检测法通常在多孔微量板中进行，这样可以很方便进行血清的稀释和检测。过表达细胞系构建为了更好的理解ELISA工作原理，我们来仔细看看，在检测时多孔板的其中的一个孔中发生什么。
　　在进行检测前，先用目标抗原包被多孔板的每个孔（对于商业化的检测），制造商会把这个步骤做好。
　　首先，在开始检测时，我们会在测试孔中加入稀释过的患者血清。如果病人血清中有相应的抗体，它们会与固定在孔底的抗原结合，只有抗原特异性抗体才会固定在孔中。
　　接着（用缓冲液）清洗这些孔，将所有未集合的抗体去除。然后，加入含有动物抗体的溶液（这里的动物抗体能够抗人类的抗体）。这第二种抗体（动物抗体）上共价结合了一个酶。再次清洗这些孔，这次是为了清除去未结合的酶标记抗体。
　　最后，加入一种显色溶液，这种溶液含有一种可以被酶催化显色的底物。底物与第二种抗体上的酶相互作用。可以使溶液呈现明显的颜色。可以通过肉眼观察或仪器定量读取每个孔中特定抗体的显示结果。
　　随着血清不断稀释，和抗原结合的抗体量就会减少，反应的颜色也会越来越淡，能出现显色反应的最高稀释倍数就是所测样品的特价。